Assise, cité médiévale bâtie sur une colline, est le lieu de naissance de saint François, étroitement associé à l'œuvre de l'Ordre franciscain. Ses chefs-d'œuvre de l'art médiéval, tels que la basilique Saint-François et les peintures de Cimabue et de Giotto, ont fait d'Assise une référence fondamentale pour le développement de l'art et de l'architecture italiens et européens. Après la mort de saint François et de sainte Claire, des églises furent construites en leur honneur. L'église Saint-François, appelée basilique Saint-François d'Assise, est célèbre pour avoir été le lieu de sa sépulture. Elle est également célèbre pour ses fresques ornant ses murs et ses plafonds. De nombreux visiteurs se rendent à Assise en pèlerinage. Assise a été inscrite au patrimoine mondial de l'UNESCO en 2000.

La Portioncule est une petite église catholique située dans la basilique papale Sainte-Marie-des-Anges d'Assise. C'est là que le mouvement franciscain est né. Le nom de Portioncule (qui signifie « petite portion de terre ») est mentionné pour la première fois dans un document de 1045, aujourd'hui conservé dans les archives de la cathédrale d'Assise. La chapelle était située sur une petite portion de terre (« Portioncule ») appartenant à l'ordre de Saint-Benoît du Mont Subasio. Plus tard, le nom de la terre a été transmis à la petite église elle-même.[2] Elle était en mauvais état, abandonnée dans un bois de chênes. Après un pèlerinage à Rome, où il mendiait aux portes des églises pour les pauvres, François raconta avoir eu une vision mystique de Jésus-Christ dans la chapelle Saint-Damien, au bord du chemin, à environ trois kilomètres d'Assise. L'icône du Christ Crucifié s'anima et lui dit à trois reprises : « François, François, va réparer ma maison qui, comme tu le vois, tombe en ruines. » François prit cela au sens littéral, désignant l'église en ruine où il priait. Il vendit donc son cheval et des vêtements du magasin de son père pour aider le prêtre à cette fin. Son père, Pietro, très indigné, demanda restitution. Après un dernier entretien en présence de l'évêque, François renonça à son père et à son patrimoine, abandonnant même les vêtements qu'il avait reçus de lui. Pendant les deux mois qui suivirent, il vécut mendiant dans la région d'Assise. De retour dans la ville pour deux ans cette fois, il restaura plusieurs églises en ruine, parmi lesquelles la Portioncule, petite chapelle de Sainte-Marie des Anges, juste à l'extérieur de la ville.

La basilique Sainte-Claire d'Assise, réalisée en pierre rose typique extraite des carrières du mont Subasio, abrite de précieuses fresques datant de la période allant du XIIe au XIVe siècle. Dans la chapelle de droite, le long de l'unique nef de Sainte-Claire d'Assise, terminée par un transept et une abside polygonale, on peut admirer le Crucifix qui, selon la tradition, aurait invité saint François à l'église Saint-Damien pour « reconstruire l'église ». Cette chapelle et la suivante sont les vestiges de l'église Saint-Georges préexistante et représentent la partie la plus ancienne de l'édifice. Dans la crypte, on conserve les restes de sainte Claire d'Assise et quelques reliques particulièrement bien conservées, parmi lesquelles un habit de saint François et un tissu réalisé par sainte Claire.

Située à moins de deux heures de route, Orvieto était une importante cité-État étrusque. Son histoire unique remonte à plusieurs millions d'années. L'origine du rocher d'Orvieto est probablement due à une ancienne éruption volcanique. On pense que le rocher actuel, où se dresse la ville d'Orvieto, est l'une de ces immenses masses de tuf éjectées du grand cratère qui est aujourd'hui le lac de Bolsena. Les Étrusques ont habité Orvieto jusqu'au IIIe siècle avant J.-C., avant d'être envahie par les Romains. Il leur a fallu deux ans pour conquérir Orvieto, forteresse naturelle entourée de falaises. Les Étrusques avaient creusé un réseau complexe de grottes et de nombreux puits afin de défendre Orvieto pendant longtemps. En plus d'être connue pour sa cuisine de haute qualité (par exemple, les truffes), la ville possède une incroyable cathédrale gothique avec un « Jugement dernier » orné de fresques rivalisant avec celui de Michel-Ange, un labyrinthe de souterrains antiques et le puits de Saint-Patrick.