La visite commence par la collection de sculptures romaines et grecques antiques, découvertes lors de fouilles à travers Rome. Lorsque l'Italie centrale était sous domination papale, le Vatican détenait les droits sur toutes ces découvertes. Votre guide vous montrera les plus importantes d'entre elles, notamment l'Apollon du Belvédère, le Torse, les bustes de Claude et d'Hadrien, ainsi que les sarcophages d'Hélène et de Constance, mère et fille de l'empereur Constantin. La visite se poursuivra ensuite par la Salle des Animaux et la Galerie des Candélabres, où vous pourrez admirer (et marcher sur) de rares mosaïques romaines et les magnifiques statues de Diane d'Éphèse, des Muses et de nombreux philosophes grecs. Vous découvrirez ensuite la Galerie des Tapisseries, la Salle Sobieski et les Chambres de Raphaël. Anciens appartements privés du pape Jules II, les Chambres de Raphaël furent décorées par Raphaël et ses apprentis et abritent deux de ses chefs-d'œuvre les plus célèbres : le Parnasse et l'École d'Athènes.

Une visite du Vatican serait incomplète sans une visite de la célèbre chapelle Sixtine, l'attraction la plus populaire d'Italie. Votre guide vous parlera des fresques de Michel-Ange – Le Jugement dernier, La Création d'Adam et La Genèse – ainsi que des histoires de Moïse et de Jésus peintes par Botticelli, le Pérugin et d'autres maîtres de la Renaissance. La chapelle est encore utilisée aujourd'hui pour les élections papales, appelées conclaves.